第十九章 掉链子 (第2/2页)
在此过程中,真正发生转染的细胞数量极低,绝大多数并未发生转染,我们如何将完成转染的细胞挑选出来呢?
我们挑选转染细胞株的手段,就是通过遗传标记,只要细胞发生了转染,遗传标记就会发生作用,表现出一定的生理特征,通过这一生理特征,可以方便地将转染细胞挑选出来。
美津在质粒中加入的遗传标记有两个,其一是抗性标记,只要转染成功,细胞将对特定的抗生素具有抗性,如果我们在培养基内添加该抗生素,细胞依旧可以生长,说明很有可能是转染株,直接挑出即可;另一个遗传标记是营养缺陷,在细胞转染中,使用得最多的是二氢叶酸缺陷型,只要培养基没有添加二氢叶酸,细胞便不会正常生长!
实验中,两种标记可以同时筛选,也可以分步操作,结果殊途同归,当然,同时筛选的效率更高,但需要更加丰富的实验经验。
秦雅经验不足,采用了分步操作方式,即使这样,仍然没有筛选成功。
在抗生素环境中,没有细胞正常生长,说明没有出现该遗传标记的生理特征,质粒没有被整合进主基因序列,转染环节出现了问题!
“做过镜检吗?”林萧然也意识到了问题的严重性,他沉声问道。
“做了,能检出细胞,但细胞的数量太少,说明生长受到了极大的抑制,你说……,现在怎么办啊!”秦雅说话间,都快哭出声了。
啧……,林萧然当然知道转染出现了问题,这种操作,对于不是十分专业的团队来说,确实难度很高,但对于美津而言,就不应该了。
转染操作说起来高深,在拥有先进的转染设备后,也就是那么回事儿,想失误都难,秦雅在这里都能出错,也真是没谁了!
美津的转染设备是比较先进的激光脉冲转染仪,它发射一种高频激光脉冲,可以击穿细胞膜与细胞核膜,形成物理通道,质粒就有机会通过该通道进入细胞核,在随后的细胞分裂中,有机会被整合进入主基因序列。
这一过程是不可见的,一切都要凭感觉,但只要运气不是太差,基本不可能失误!
林萧然忽然有种骂人的冲动,心说为了拿到质粒,我费了多少心思啊,可你却在转染环节掉了链子,你不是名牌大学毕业生嘛,不是一直有优越感嘛,为什么实际操作如此不堪!
想骂归想骂,脸上却不能有任何表露,对方已经受到了沉重地打击,如果再说一些重话,恐怕就要崩溃了,唉!
稳定了一下心神,林萧然脸上挤出一点微笑,宽慰说道,“我也认为转染出现了问题,重新做一次吧,不是什么大事。”
说罢,他再次清理了一下思绪,让对方看起来风轻云淡,并没有因为低级失误,有特别表现。
可是林萧然等待了片刻,没有听到回音,再次看向对方,却发现秦雅居然哭得梨花带雨。
“哎,你不用这样吧,工作的事情,至于这么走心嘛!”他有些慌神,这个秦雅啊,怎么说哭就哭呢,不知道的还以为自己欺负了人家!
他只能又一次递上纸巾。
“转染实验我做过多次,不是没有经验,做得相当熟了,但这是我工作以来,第一次独立开展实验,所以,实验前特意告诫自己谨慎,不能出现任何纰漏,实验进行得相当小心,但结果你看到了,还是出现了问题,呜……。”
“转染实验,谁都没有把握一次性成功,大不了再来一次,如果觉得今天情绪不稳定,明天再做不迟!”林萧然搓着手道。
“忙活了将近两个星期,却得到了这样一个结果,我现在都在怀疑自己,到底适合不适合这项工作,平时操作没有问题,偏生自己动手的时候,问题就来了。”
“不要给自己太大的压力,也不要轻言放弃,嗯,下一次……,我相信下一次一定可以成功!”除了这些宽慰的话,林萧然真不知道该说些什么。
“下一次?呵呵,我怕两个星期后又是这样一个结果!”
“哪能呢,你行的,我知道你一定能行。”
“你看这样行吗,林萧然,项目……,我们还是一起做吧,我自己……,有点没信心了。”秦雅垂头丧气说道。
那是我特意挑出来的质粒啊,注定可以成功表达出目的蛋白,喊上我干嘛!
知道其中内情的林萧然,心中猛然一惊!